
Spanish: 
Todos sabemos algo sobre la fermentación.
Es un proceso utilizado innumerables veces al día para hacer una variedad de productos lácteos,
productos horneados y bebidas. A veces pensamos que es dejar alimentos
se pongan malos, pero de forma controlada. Con un poco de ayuda, la leche se convierte en yogurt
el pan se eleva y los granos se descomponen, creando bebidas alcohólicas
y combustibles alternativos.
Pero mirar estos ejemplos solo nos da una pista de lo que realmente está sucediendo y

Portuguese: 
Todos sabemos algo sobre fermentação.
É um processo realizado inúmeras vezes todos os dias
para produzir diversos laticínios,
pães e bebidas.
Podemos pensar que é como deixar uma comida estragar,
mas de forma controlada.
Com uma pequena ajuda, leite vira iogurte,
o pão cresce...
e grãos se decompõem,
produzindo bebidas alcóolicas.
e combustíveis alternativos.
Mas estes exemplos nos dão apenas uma idéia do que realmente está se passando
e de como podemos aproveitar o potencial da fermentação

English: 
>>We all know something about fermentation.
It's a process used countless times each day
to make a variety of dairy products, baked
goods and beverages.
We sometimes think of it as letting foods
go bad, but in a controlled way.
With a little help, milk becomes yogurt...
bread rises...
and grains decompose, creating alcoholic beverages
and alternative fuels.
>>But looking at these examples only gives
us a clue as to what's really happening and

Portuguese: 
para criar uma vasta gama de produtos biológicos de forma eficiente.
Então, o que é fermentação?
Uma célula pode ser vista como uma micro-fábrica.
Elas podem ser bactérias, fungos ou células específicas de mamíferos, plantas ou insetos.
Em biotecnologia, essas células são usadas para
fabricar um produto em um processo chamado de
fermentação.
Para iogurte, leitelho e queijo, usamos bactérias.
Para fazer pães e bebidas alcóolicas
usamos uma levedura - um fungo!
E a produção de algumas vacinas requer o cultivo de células de mamíferos
infectadas com um vírus específico.
O produto fabricado pelas células é geralmente uma substância que a células contêm naturalmente...
ou uma substância que as células foram geneticamente modificas para produzir.
Ou até um resíduo metabólico do crescimento desse organismo -

English: 
how we can use the power of fermentation to
cost-effectively create a broad array of biological
products.
>>So, what is fermentation?
A cell can be thought of as a micro-factory.
These cells can be bacteria, fungi or specific
cells from mammals, plants or insects. In
Biotechnology, these cells are used to manufacture
a product in a process called fermentation.
>>For yogurt, buttermilk and cheese, we use
bacteria.
To make breads and alcoholic beverages we
use yeast - a fungus!
And the production of some vaccines requires
the growth of mammalian cells that are infected
with a specific virus.
>>The product the cells manufacture is usually
a chemical the cells contain naturally...
or a substance that the cells have been genetically
altered to create...

Spanish: 
cómo podemos usar el poder de la fermentación para crear de manera económica una amplia gama de productos biológicos
 
Entonces, ¿qué es la fermentación?
Una célula puede considerarse una micro fábrica. Estas células pueden ser bacterias, hongos o células  específicas
de mamíferos, plantas o insectos. En Biotecnología, estas células se usan para fabricar
un producto en un proceso llamado fermentación
Para yogurt, suero de leche y queso, usamos bacterias.
Para hacer panes y bebidas alcohólicas usamos levadura, ¡un hongo!
Y la producción de algunas vacunas requiere el crecimiento de células de mamíferos infectadas
con un virus específico.
El producto que las células fabrican es generalmente un químico que las células contienen naturalmente
o una sustancia que las células han sido genéticamente alteradas para crear,

Portuguese: 
como um dos nossos exemplos, o álcool!
Há incontáveis produtos cotidianos oriundos da fermentação em escala comercial,
mas alguns dos mais comuns são:
aminoácidos,
biofármacos,
tintas, enzimas, produtos alimentícios,
lipídeos, esteróides
e vitaminas.
Fermentação é um processo relativamente simples.
Uma célula é escolhida de acordo com sua capacidade
de produzir o produto desejado.
Uma cultura inicial de células é colocada em um pequeno volume de meio.
O meio fornece os nutrientes de que a célula necessita para crescer.
Quando a população de células já cresceu
e consumiu a maior parte dos nutrientes
ela é transferida para um recipiente maior com mais meio de cultivo
e o processo se repete.

English: 
or even a metabolic waste product of the organism's
growth - like one of our examples, alcohol!
>>There are too many everyday products created
by commercial-scale fermentation to even list,
but some common ones include: amino acids,
biopharmaceuticals, dyes, enzymes, food products,
lipids, steroids and vitamins.
[Music Fades, Nat Sound of Process Establishes,
Under For VO]
>>Fermentation is a reasonably simple process.
A cell is selected based on its ability to
produce the desired product.
A seed stock of cells is put into a small
amount of media. Media provides the nutritional
products the cell needs to grow.
When the population of cells has grown and
consumed most of the nutrients, it's moved
into a larger vessel with more growth media,
and the process repeats...

Spanish: 
o incluso un producto de desecho metabólico del crecimiento del organismo, como uno de nuestros ejemplos, ¡el alcohol!
Hay demasiados productos cotidianos creados por fermentación a escala comercial para igualar la lista,
pero algunos más comunes incluyen: aminoácidos, productos biofarmacéuticos, tintes, enzimas, productos alimenticios,
lípidos, esteroides y vitaminas.
 
La fermentación es un proceso razonablemente simple. Una celda se selecciona en función de su capacidad para
producir el producto deseado Un stock de semillas de células se pone en pequeña
cantidad de medios. Los medios proporcionan los productos nutricionales que la célula necesita para crecer.
Cuando la población de células ha crecido y ha consumido la mayoría de los nutrientes, se mueve
a un recipiente más grande con más medios de crecimiento, y el proceso se repite

Portuguese: 
Esse "scaling-up" termina quando a quantidade de células
é grande e forte o suficiente para ser transferida
a um tanque de produção,
comumente chamado de biorreator ou fermentador.
Agora com bastante meio fresco disponível
e sob condições estritamente controladas,
as células crescem e fabricam o produto.
Quando a fermentação termina,
o produto é recolhido.
A fermentação é considerada um processo biotecnológico de "upstream".
Ela ocorre no começo da cadeia de produção,
antes da separação
purificação,
formulação,
enchimento
e empacotamento.
Para compreender melhor o processo de fermentação,
primeiro precisamos saber um pouco sobre as células usadas
e suas necessidades para se reproduzirem e permanecerem saudáveis
Células distintas têm necessidades distintas.
Algumas são aeróbicas
(precisam de oxigênio)
Enquanto outras são anaeróbicas e não precisam de oxigênio.
Todas as células precisam de nutrição.

English: 
This "scaling-up" is complete when the quantity
of cells is large and healthy enough to transfer
into a production vessel - often referred
to as a bioreactor or fermentor.
>>With plenty of fresh media now available
and under tightly controlled conditions, the
cells grow and manufacture product.
When the fermentation is complete, the product
is harvested.
>>Fermentation is known as an "upstream" biotechnology
process. It occurs early in the production
flow, before Recovery, Purification, Formulation,
Filling and Packaging.
To better understand the fermentation process,
we should first find out a little bit about
the cells we use and what they may require
to reproduce and stay healthy.
Different cells have different needs. Some
are aerobic - they need oxygen - while others
are anaerobic and do not require oxygen.

Spanish: 
Esta "ampliación" se completa cuando la cantidad de células es grande y lo suficientemente saludable para transferir
en un recipiente de producción, a menudo denominado biorreactor o fermentador.
Con una gran cantidad de medios frescos ahora disponibles y en condiciones estrictamente controladas, la
células crecen y fabrican productos. Cuando la fermentación está completa, el producto
es cosechado.
La fermentación se conoce como un proceso de biotecnología "río arriba". Se produce al principio del
flujo de producción, antes de la recuperación, purificación, formulación, llenado y envasado.
Para comprender mejor el proceso de fermentación, primero debemos averiguar un poco sobre
las células que usamos y qué pueden requerir para reproducirse y mantenerse saludables.
Diferentes células tienen diferentes necesidades. Algunos son aeróbicos, necesitan oxígeno, mientras que otros
son anaeróbicos y no requieren oxígeno.

Spanish: 
Todas las células requieren nutrición. Un medio formulado adecuadamente contiene los nutrientes necesarios
para permitir que las células crezcan y produzcan. El fermentador mezcla las células de manera uniforme en todo
el medio para suspender las células y suministrar el oxígeno necesario para el crecimiento.
La fermentación eficaz y eficiente requiere una supervisión y un control rigurosos del medio ambiente
dentro del biorreactor. Los factores clave incluyen temperatura, presión,
el pH, que es una medida de qué tan ácidos o alcalinos son los medios, el oxígeno, generalmente medido como
oxígeno disuelto en los medios y los niveles de nutrientes.
Aunque el entorno y los medios se adaptan a las necesidades de células específicas, el
ciclo de vida de casi todos los lotes sigue un patrón predecible.
El patrón de crecimiento tiene cuatro fases: Lag, Exponencial o Log, Estacionario y Muerte.

Portuguese: 
Um meio formulado corretamente
contém os nutrientes necessários
para permitir que as células cresçam e produzam.
O fermentador mistura as células uniformemente dentro do meio
para suspender as células e fornecer o oxigênio necessário para o crescimento.
Fermentação efetiva e eficiente
requer monitoramento rígido e controle do ambiente
dentro do biorreator.
Fatores essenciais incluem: temperatura, pressão
pH, que é uma medida do quão ácido ou alcalino está o meio,
oxigênio, geralmente medido como oxigênio dissolvido no meio
e níveis de nutrientes.
Embora o ambiente e o meio sejam ajustados
para as  necessidades de células específicas,
o ciclo de vida da maioria dos cultivos descontínuos segue um padrão previsível.
O padrão de crescimento tem quatro fases:
Lag
Exponencial ou Log
Estacionária
e Morte

English: 
>>All cells require nutrition. A properly
formulated media contains the necessary nutrients
to allow cells to grow and produce.
The fermentor mixes the cells evenly throughout
the media to suspend the cells and supply
the oxygen necessary for growth.
Effective and efficient fermentation requires
rigorous monitoring and control of the environment
within the bioreactor.
Key factors include temperature, pressure,
pH - which is a measure of how acidic or alkaline
the media is, oxygen - usually measured as
dissolved oxygen within the media, and nutrient
levels.
Although the environment and the media are
tailored to the needs of specific cells, the
lifecycle of almost all batches follows a
predictable pattern.
The growth pattern has four phases: Lag, Exponential
or Log, Stationary and Death.

Spanish: 
Cuando una célula se presenta por primera vez a medios nuevos, debe adaptarse a su nuevo entorno.
Esto crea una pausa o retraso en la línea de tiempo de crecimiento. Después de que el organismo se adapta,
despega! Las células comienzan a dividirse a una velocidad constante: un exponencial o logarítmico (o "Log")
incrementar; doblando, luego doblando de nuevo, y así sucesivamente
A medida que se consumen los nutrientes en los medios, se acumulan productos tóxicos de desecho metabólico, las células
comienzan a morir y el crecimiento se ralentiza. Cuando llega al punto en el que tantas
células mueren como se están dividiendo, el lote ingresa a la fase estacionaria.
Este es el punto en el que los nutrientes clave se consumen por completo, la fermentación
se detiene y el caldo fermentado se cosecha. Si se permitió que la fermentación continuara,

Portuguese: 
Quando uma célula é introduzida em meio fresco,
ela deve se adaptar ao seu novo ambiente.
Isso cria uma dormência ou Lag na curva de crescimento.
Depois que o organismo se adapta, a batelada começa!
As células começam a se dividir com uma taxa constante:
um crescimento Exponencial ou Logarítmico (ou "Log")
se duplicando,
e de novo,
e assim por diante.
À medida em que os nutrientes do meio são consumidos,
metabólitos residuais tóxicos começam a acumular,
células começam a morrer, e o crescimento desacelera.
Quando atinge-se o ponto em que é igual o número de células morrendo e se dividindo,
o cultivo entra na fase estacionária.
Este é o ponto em que os principais nutrientes se esgotaram,
a fermentação é interrompida
e o caldo fermentado é recolhido.
Se a fermentação pudesse continuar,

English: 
>>When a cell is first introduced to fresh
media, it has to adapt to its new environment.
This creates a lull or Lag in the growth timeline.
After the organism adapts, the batch takes
off! The cells begin dividing at a constant
rate - an Exponential or Logarithmic (or "Log")
increase; doubling, then doubling again, and
on and on...
As the nutrients in the media are consumed,
toxic metabolic waste products build up, cells
begin to die, and growth slows.
When it reaches the point that just as many
cells are dying as are dividing, the batch
enters the Stationary phase.
This is the point at which the key nutrients
are completely consumed, the fermentation
is stopped and the fermented broth is harvested.
If the fermentation were allowed to continue,

English: 
the cells would enter the Death phase. More
cells die than divide, and - similar to the
Exponential phase - the death rate increases
logarithmically.
Now that we have a basic understanding of
how Fermentation works, let's look at an actual
process and see how it all comes together.
For our sample process we will look at the
production of Green Fluorescent Protein, or
GFP.
GFP is broadly used as a biological marker.
It's a fluorescent dye that's very well tolerated
by most cells and doesn't interfere with normal
cellular function..
In the GFP fermentation process, we'll need
to add an antibiotic to protect the purity
of the batch, and then - late in the process
- a biochemical inducer to "turn on" the GFP

Portuguese: 
as células entrariam na fase de morte.
Mais células morrem do que se multiplicam
e, assim como na fase exponencial,
a taxa de morte aumenta logaritmicamente.
Agora que sabemos o básico sobre como funciona uma fermentação,
vamos olhar para um processo real
e ver como tudo se encaixa.
Como processo ilustrativo, estudaremos a produção
de Proteína Verde Fluorescente
ou GFP.
GFP é muito usado como marcador biológico.
É um pigmento fluorescente bastante tolerado pela maioria das células
e que não interfere no funcionamento normal da célula.
No processo de fermentação do GFP,
precisamos adicionar um antibiótico para garantir a pureza no cultivo,
e depois, ao fim do processo,
um indutor bioquímico para "ativar" o gene do GFP.

Spanish: 
las células entrarían en la fase de Muerte. Más células mueren que se dividen, y - similar a
la fase exponencial - la tasa de mortalidad aumenta logarítmicamente.
Ahora que tenemos una comprensión básica de cómo funciona la fermentación, veamos un
proceso real y veamos cómo funciona todo.
Para nuestro proceso de muestra veremos la producción de Proteína Fluorescente Verde, o
GFP. GFP se usa ampliamente como un marcador biológico.
Es un tinte fluorescente que es muy bien tolerado por la mayoría de las células y no interfiere con la
función celular normal
En el proceso de fermentación de GFP, necesitaremos agregar un antibiótico para proteger la pureza
del lote, y luego, al final del proceso, un inductor bioquímico para "activar" el gen de GFP.

Portuguese: 
Nosso materiais para esse processo incluem:
Uma cultura estoque da bactéria, neste caso E. coli
que foi geneticamente melhorada para produzir GFP.
Os ingredientes básicos para um meio compatível
que inclui nutrientes,
estabilizantes,
um antibiótico,
e um agente anti-espumante...
e IPTG
que é um indutor bioquímico ativador do gene do GFP
O equipamento que usaremos inclui um biorreator de 300 litros,
um espectrofotômetro UV-Vis para monitorar a densidade óptica,
que é uma medida da concentração de células no biorreator,
um analisador de glicose, para medir glicose,
um nutriente chave,
um pHmetro off-line para ajudar a acompanhar o balanço ácido/base
e ajustar medições on-line se preciso...
e um tanque de caldo para o nosso produto final.

Spanish: 
Nuestros materiales para este proceso incluirán:
Una reserva de semillas de bacterias, en este caso E. coli, que se ha mejorado genéticamente mejorada para producir
GFP... los ingredientes básicos para un medio compatible
que incluye nutrientes, estabilizantes, un antibiótico y un agente antiespumante ...
e IPTG que es el inductor bioquímico que "activa" el gen GFP.
El equipo que vamos a utilizar incluye un biorreactor de 300 litros,
un espectrofotómetro UV / Vis para controlar la densidad óptica, que es una medida de
la concentración de células en el biorreactor, un analizador de glucosa, para medir la glucosa,
un nutriente clave, un medidor de pH fuera de línea para ayudar a rastrear el equilibrio ácido / base
y ajustar las mediciones en línea, si es necesario ...

English: 
gene
Our materials for this process will include:
A bacteria seed stock - in this case E. coli
- that has been genetically enhanced to produce
GFP...
the basic ingredients for a compatible media
which include nutrients, stabilizers, an antibiotic
and an antifoaming agent...
and IPTG which is the biochemical inducer
that "switches-on" the GFP gene.
The equipment that we'll be using includes
a 300 liter bioreactor,
a UV/Vis Spectrophotometer to monitor the
optical density, which is a measure of the
concentration of cells in the bioreactor -
a glucose analyzer, to measure glucose, a
key nutrient -
an off-line, pH meter to help track the acid/base
balance, and adjust on-line measurements,
if needed...

Spanish: 
y un tanque de caldo para nuestro producto final.
El biorreactor está equipado con una camisa de agua alrededor del recipiente para regular la temperatura,
y sensores integrados para monitorear factores ambientales clave, incluyendo oxígeno disuelto, pH,
la temperatura interna, la temperatura de la camisa de agua y la presión del recipiente.
El reactor también tiene un agitador, puertos dedicados para agregar material de siembra e ingredientes de medios,
puertos separados para el suplemento ácido y base, filtros de aire para suministro y escape, y válvulas
para extraer muestras y para cosechar. La mayoría de las funciones de fermentación y monitoreo
se pueden administrar desde el controlador de proceso dedicado del biorreactor.
Antes de que el proceso de fermentación pueda comenzar, el área debe estar preparada.
La preparación incluye la eliminación de equipos y materiales que no se usarán en el proceso ...

English: 
and a Broth Tank for our final product.
The bioreactor is equipped with a water jacket
around the vessel to regulate temperature,
and integrated sensors to monitor key environmental
factors, including dissolved oxygen, pH, internal
temperature, water-jacket temperature and
vessel pressure.
The reactor also has an agitator, dedicated
ports for adding seed stock and media ingredients,
separate ports for acid and base supplement,
air filters for supply and exhaust, and valves
for drawing samples and for harvesting.
Most fermentation and monitoring functions
can be managed from the bioreactor's dedicated
process controller.
Before the fermentation process can begin,
the area must be prepared.
Preparation includes removing equipment and
material that won't be used in the process...

Portuguese: 
O biorreator é equipado com uma camisa de água em volta do tanque para regular a temperatura
e sensores integrados para monitorar fatores chave do ambiente,
incluindo: oxigênio dissolvido,
pH,
temperatura interna,
temperatura da água na camisa,
e pressão no vaso.
O reator tem também um agitador,
portas para alimentar a cultura estoque e ingredientes do meio,
portas separadas para suplementar com ácido e base,
filtros de ar para alimentação e exaustão,
e válvulas para retirar amostras e extrair material.
Boa parte do funcionamento e monitoramento do reator
podem ser feitos a partir do controlador de processo conectado.
Antes de começar a fermentação,
a área deve ser preparada.
A preparação inclui: remover equipamentos e materiais que não serão utilizados no processo

English: 
Cleaning and sanitizing the area and equipment...
and sterilizing equipment as required by the
SOPs - Standard Operating Procedures.
Sterilization is used to eliminate unwanted
microorganisms which can grow naturally in
the fermentation media and process equipment.
Also, all required materials and documentation
should be gathered and prepared...
and all Process Control software should be
loaded and verified.
The Fermentation batch process will be guided
and documented with the BPR - Batch Process
Record.
The Batch Record leads the operator through
the process, step-by-step...
with each step requiring a sign-off and separate
verification.
This record also includes spaces for documenting

Portuguese: 
Limpar e desinfetar a área e os equipamentos
e esterilizar os equipamentos conforme os POPs:
Procedimentos Operacionais Padrão.
A esterilização é feita para eliminar microorganismos indesejados
que podem crescer naturalmente no meio e no equipamento para a fermentação.
Além disso, os materiais e a rotulação necessárias devem ser separados e preparados.
E o software de Controle de Processos deve ser ligado e verificado.
O processo de fermentação descontínuo será guiado e documentado por meio de um BPR
"Batch Process Record" (registro de controle do processo)
O BPR guia o operador ao longo do processo, passo a passo...
sendo que cada passo requer uma assinatura e verificação individual.
Esse registro também inclui espaços para documentar tempos importantes,
atividades e leituras dos medidores.

Spanish: 
Limpiar y desinfectar el área y el equipo ... y esterilizar el equipo según lo requieren los
SOP: Procedimientos operativos estándar. La esterilización se usa para eliminar los microorganismos
no deseados que pueden crecer de forma natural en los medios de fermentación y los equipos de proceso.
Además, todos los materiales requeridos y la documentación deben ser reunidos y preparados
y todo el software de Control de procesos debe cargarse y verificarse.
El proceso por lotes de fermentación se guiará y documentará con BPR - Resgistro del proceso por lotes
El Registro de lotes lleva al operador a través del
proceso, paso a paso, con cada paso que requiere un inicio de sesión y verificación por separado.
Este registro también incluye espacios para documentar

Portuguese: 
O processo de fermentação GFP realmente começa
com a expansão da cultura estoque da nossa bactéria.
Depois de remover do freezer e descongelar a E. coli especialmente modificada,
ela é usada para inocular uma pequena quantidade de meio fresco em um frasco shaker.
Quando o número de células atinge a quantidade desejada,
as células vivas estão prontas para a fermentação.
Enquanto isso, na área da Fermentação,
operadores começam a checar todos os equipamentos críticos.
Válvulas, tampas e linhas são averiguadas...
Mangueiras são apertadas,
sondas são verificadas e calibradas.
E 10 kg de AUP  (Água Ultrapura)
são adicionados ao vaso.
O biorreator é levado à pressão normal do processo

English: 
key times, activities and instrument readings.
The GFP fermentation process really begins
with the expansion of our bacteria seed stock.
After removing the specially modified E-coli
from the freezer and thawing it...
It's used to inoculate a small amount of fresh
media in a shaker flask.
After the number of cells has reached the
target amount, the thriving cells are ready
for fermentation.
Meanwhile, in the Fermentation area, operators
begin with a complete check of all critical
equipment.
Valves, caps and lines are checked, hoses
are tightened...
probes are verified and calibrated.
and 10 kilograms of HPW - High Purity Water
- is added to the vessel.
The bioreactor is brought up to normal process
pressure and held there in order to check

Spanish: 
tiempos clave, actividades y lecturas de instrumentos.
El proceso de fermentación de GFP realmente comienza con la expansión de nuestro stock de semillas de bacterias.
Después de quitar el E-coli especialmente modificado del congelador y descongelarlo.
Se usa para inocular una pequeña cantidad de medio fresco en un matraz vibratorio.
Después de que la cantidad de células ha alcanzado la cantidad objetivo, las células prósperas están listas
para la fermentación. Mientras tanto, en el área de fermentación, los operadores
comienzan con una verificación completa de todos los equipos críticos.
Se verifican las válvulas, los tapones y las líneas, se ajustan las mangueras.
as sondas son verificadas y calibradas y 10 kilogramos de HPW - Agua de alta pureza
- se agrega al recipiente.
El biorreactor se lleva a presión de proceso normal y se mantiene allí para verificar

Spanish: 
si hay fugas. La presión se controla durante un periodo de 30 minutos.
Si se detecta una fuga, el problema se corrige
y la prueba se ejecuta nuevamente. Una vez que el reactor pasa la prueba, estamos listos
para mezclar los medios en el recipiente. El agitador está encendido, y los ingredientes
se agregan: Extracto de levadura,
Caldo de soja tríptico, Cloruro de amonio,
Bifosfato de sodio, Fosfato de monopotasio
y un compuesto Antiespumante.
Una vez que todos los ingredientes iniciales están en su lugar, se agregan otros 10 kilogramos de agua de alta pureza
y todos los puertos y válvulas se cierran; todas las válvulas de condensado se abren

English: 
for leaks.
The pressure is monitored over a 30 minute
period.
If a leak is detected, the problem is corrected
and the test is run again.
Once the reactor passes the test, we are ready
to mix the media in the vessel.
The agitator is turned on, and the ingredients
are added:
Yeast Extract...
Tryptic Soy Broth...
Ammonium chloride...
Sodium biphosphate...
Monopotassium phosphate...
and an Antifoam compound.
Once all the initial ingredients are in, another
10 kilograms of High Purity Water is added...
all ports and valves are closed...
all condensate valves are opened...

Portuguese: 
e mantido nessa condição para checar se há vazamentos.
A pressão é monitorada por um período de 30 minutos.
Se é detectado um vazamento, o problema é corrigido e o teste é feito novamente.
Um vez que o reator passa no teste, estamos prontos para misturar o meio no vaso.
O agitador é ligado.
E os ingredientes são adicionados:
Extrato de levedura,
caldo tríptico de soja,
cloreto de amônio
fosfato dissódico
fosfato monopotássico
e um agente anti-espumante.
Uma vez que todos os ingredientes iniciais estão no meio,
mais 10 kg de Água Ultrapura são adicionados.
Todas as portas e válvulas são fechadas,
Todas as válvulas para purga de condensado são abertas
e o biorreator começa o ciclo SIP

English: 
and the bioreactor begins an SIP - Sterilize-In-Place
cycle.
The target for sterilization is 121 degrees
Celsius for 30 minutes.
As soon as the temperature climbs to the targeted
temperature, the condensate valves are closed,
and the SIP cycle completes automatically.
Both the vessel and the media are now sterile
-
And we're ready to add the final ingredients
to our media.
The glucose hose is attached to the vessel
the connection is steamed to sterilize it
and the separately sterilized glucose-antibiotic
solution is pumped into the vessel.
Then a manual pH reading of the media is taken
and the bioreactor is set up for its fermentation
cycle.
After the inoculation hose is connected to

Spanish: 
y el biorreactor comienza un ciclo SIP - Esterilizar en el lugar.
El objetivo para la esterilización es 121 grados Celsius durante 30 minutos.
Tan pronto como la temperatura sube a la temperatura deseada, las válvulas de condensación están cerradas,
y el ciclo SIP se completa automáticamente.
Tanto el recipiente como los medios son ahora estériles,
y estamos listos para agregar los ingredientes finales a nuestros medios.
La manguera de glucosa está conectada al recipiente, la conexión se cuece al vapor para esterilizarla
y la solución de glucosa-antibiótico esterilizada por separado se bombea al recipiente.
Luego se toma una lectura manual del pH del medio y el biorreactor se configura para su ciclo de fermentación.
Después de que la manguera de inoculación está conectada

Portuguese: 
(esterilização in situ)
A esterilização deve ocorrer a 121 °C por 30 minutos.
Assim que a temperatura sobe para o valor desejado,
as válvulas para purga de condensado são fechadas,
e o ciclo SIP termina automaticamente.
Neste ponto tanto o vaso quanto o meio estão estéreis.
E estamos prontos para juntar os ingredientes finais ao nosso meio.
A mangueira de glicose é encaixada no vaso
A conexão é esterilizada com vapor
E a solução antibiótica com glicose esterilizada separadamente é bombeada para o vaso.
Então, faz-se uma leitura manual do pH do meio.
E o biorreator está pronto para o ciclo de fermentação.
Depois que a mangueira para inoculação tiver sido conectada ao reator

Portuguese: 
e esterilizada com vapor por 20 minutos,
A culture estoque expandida é bombeada para o reator contendo meio.
Agora a fermentação começa.
O operador faz as leituras no tempo zero
e começa a monitorar regularmente a temperatura no cultivo,
a velocidade do agitador,
níveis de oxigênio dissolvido,
pH
pressão no vaso,
densidade óptica,
vazão de ar
e concentrações de glicose.
Densidade óptica e concentração de glicose são variáveis particularmente relevantes,
então elas são tanto plotadas como registradas.
Quando os níveis desejados de glicose e densidade óptica são atingidos,
está na hora de adicionar o IPTG ao vaso
para ativar ou ligar a expressão da Proteína Verde Fluorescente  nas células.
Depois de deixar o tempo suficiente para que as células produzam a proteína verde fluorescente,
geralmente mais 5 horas,
fazemos as leituras finais

Spanish: 
al reactor y se cuece al vapor durante 20 minutos
el material de siembra expandido se bombea al reactor que contiene los medios.
La fermentación ahora comienza. El operador toma lecturas de cero horas y comienza a
monitorear regularmente la temperatura del lote, RPM del agitador, niveles de oxígeno disuelto, pH, presión del recipiente,
la densidad óptica, el índice de flujo de aire y las concentraciones de glucosa.
Las densidades ópticas y las concentraciones de glucosa son de particular interés, por lo que se grafican
y documentan. Cuando se alcanzan los niveles objetivo de glucosa y densidad óptica
es hora de agregar IPTG al vaso para activar
la expresión de la proteína verde fluorescente en las células.
Después de dejar suficiente tiempo para que las células produzcan proteína fluorescente verde por lo general

English: 
the reactor
and steamed for 20 minutes
the expanded seed stock is pumped into the
reactor containing the media.
Fermentation now begins. The operator takes
zero hour readings and begins to regularly
monitor batch temperature, agitator RPMs,
dissolved oxygen levels, pH, vessel pressure,
optical density, air flow rate and glucose
concentrations.
Optical Densities and glucose concentrations
are of particular interest, so they're graphed
as well as documented.
When the targeted levels of glucose and optical
density are achieved,
it's time to add IPTG to the vessel to activate
or turn on the expression of the Green Fluorescent
Protein in the cells.
After allowing enough time for the cells to
produce green fluorescent protein usually

English: 
5 hours more, final readings are taken
and a sample is drawn to check the percentage
of cell solids.
The product is now referred to as "broth."
The broth, which contains spent media and
cells, is complete when the key nutrient,
glucose, is mostly consumed, and the batch
has reached the desired concentration.
The batch is then cooled down, pumped into
a broth tank...
and labeled with the batch number, volume,
time and date.
[Bright, Rhythm-Driven Music Establishes,
Then Under For VO]
The Fermentation process is now complete!
The harvested broth will now move downstream
to the Recovery process where the cells will
be ruptured to free the Green Fluorescent
Protein
and the protein will be separated from the
other broth components.

Spanish: 
5 horas más tarde, se toman las lecturas finales y se toma una muestra para verificar el porcentaje
de sólidos celulares.
El producto ahora se conoce como "caldo". El caldo, que contiene los mediosy las celulas gastadas,
se completa cuando el nutriente clave, la glucosa, se consume en su mayoría, y el lote
ha alcanzado la concentración deseada.
El lote se enfría y se bombea a un tanque de caldo,
y se etiqueta con el número de lote, el volumen, la hora y la fecha.
 
¡El proceso de fermentación está completo!
El caldo cosechado ahora se moverá aguas abajo al proceso de recuperación donde las células
se romperán para liberar la proteína verde fluorescente
y la proteína se separará de los otros componentes del caldo.

Portuguese: 
e coletamos uma amostra para checar a porcentagem de sólidos celulares.
O produto agora é chamado de "caldo".
O caldo, que contém meio utilizado e células
está completo quando o nutriente principal,
a glicose,
já foi praticamente todo consumido
e o líquido já atingiu a concentração desejada.
O líquido é então resfriado,
bombeado para um tanque de caldo
e rotulado com o número da batelada, volume, tempo
e a data.
O processo de Fermentação está agora completo!
O caldo coletado será agora enviado a jusante para o processo de Separação,
onde as células serão rompidas para liberar a Proteína Verde Fluorescente.
E a proteína será separada dos outros componentes do caldo.
